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毛細(xì)管電泳法和液相法以及普通電泳法,三者區(qū)別

更新時(shí)間:2019-11-26      點(diǎn)擊次數(shù):6069
   毛細(xì)管電泳法和液相法以及普通電泳法,三者區(qū)別
  毛細(xì)管電泳法和液相法的區(qū)別
  CE和液相色譜法(HPLC)相比,其相同處在于都是分離技術(shù),儀器操作均可自動(dòng)化,且二者均有多種不同分離模式。二者之間的差異在于:CE用遷移時(shí)間取代HPLC中的保留時(shí)間,CE的分析時(shí)間通常不超過30min,比HPLC速度快;對CE而言,從理論上推得其理論塔板高度和溶質(zhì)的擴(kuò)散系數(shù)成正比,對擴(kuò)散系數(shù)小的生物大分子而言,其柱效就要比HPLC高得多;CE所需樣品為nl級(jí),低可達(dá)270fl,流動(dòng)相用量也只需幾毫升,而HPLC所需樣品為μl級(jí),流動(dòng)相則需幾百毫升乃至更多;但CE僅能實(shí)現(xiàn)微量制備,而HPLC可作常量制備。
  毛細(xì)管電泳法和普通電泳法的區(qū)別
  CE和普通電泳相比,由于其采用高電場,因此分離速度要快得多;檢測器則除了未能和原子吸收及紅外光譜連接以外,其它類型檢測器均已和CE實(shí)現(xiàn)了連接檢測;一般電泳定量精度差,而CE和HPLC相近;CE操作自動(dòng)化程度比普通電泳要高得多??傊?CE的優(yōu)點(diǎn)可概括為三高二少:高靈敏度,常用紫外檢測器的檢測限可達(dá)10-13~10-15mol,激光誘導(dǎo)熒光檢測器則達(dá)10-19~10-21mol;高分辨率,其每米理論塔板數(shù)為幾十萬;高者可達(dá)幾百萬乃至千萬,而HPLC一般為幾千到幾萬;高速度,快可在60s內(nèi)完成,在250s內(nèi)分離10種蛋白質(zhì),1.7min分離19種陽離子,3min內(nèi)分離30種陰離子;樣品少,只需nl(10-9L)級(jí)的進(jìn)樣量;成本低,只需少量(幾毫升)流動(dòng)相和價(jià)格低廉的毛細(xì)管。由于以上優(yōu)點(diǎn)以及分離生物大分子的能力,使CE成為近年來發(fā)展迅速的分離分析方法之一。

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